MMS en dirençli bakterileri bile ortadan kaldırıyor – araştırma

Klor dioksit ile antibiyotiklere dirençli bakterilerin ortadan kaldırılması

Klor dioksit, antibiyotiklere en dirençli bakterileri bile nasıl yok eder? Araştırma.

Klor dioksit MMS — Mucize Mineral Çözeltisi — antibiyotiklere dirençli bakterileri ortadan kaldırır. Bilimsel araştırma ve inceleme.

BURADAN SATIN ALIN

ÖZET

Bakteriyel antimikrobiyal direnç (AMR) dünyanın bütün bölgelerinde bir sorundur. Bakteriyel AMR ile ilişkili ölümlerin %73,4’ünden altı patojen sorumludur: Escherichia coli (E. coli), Staphylococcus aureus (S. aureus), Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae), Streptococcus pneumoniae (S. pneumoniae), Acinetobacter baumannii (A. baumannii) ve Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa).

Dünya Sağlık Örgütü 2021 yılında antimikrobiyal dirence yönelik ve hâlen yürürlükte olan bir Küresel Eylem Planı başlatmıştır. AMR ile ilişkili sağlık giderleri dünya çapında milyarlarca doları bulmaktadır.

Birleşik Krallık hükümetinin hazırlattığı bir değerlendirme, AMR’nin 2050 yılına kadar yılda on milyon kişinin ölümüne yol açabileceğini ve 21. yüzyılın en büyük halk sağlığı tehditlerinden biri olduğunu öne sürmüştür.

Sadece metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) dünya çapında 100.000’den fazla ölümle ilişkilendirilmiştir; bu çalışmada incelenen diğer patojenler de çok sayıda ölüme neden olmaktadır.

Bu araştırma, klor dioksitin beş farklı antibiyotik dirençli bakteri türünü in vitro ortamda ortadan kaldırmadaki etkinliğini, olası yeni bir tedavi yaklaşımı olarak değerlendirmeye odaklanmıştır.

Beş dirençli bakteri türüne 1–7 ppm arasında farklı klor dioksit derişimleri uygulanmıştır. Sonuçlar kontrol örnekleriyle karşılaştırılmış ve 7 ppm düzeyinde %95’in üzerinde dezenfeksiyon bildirildiği belirtilmiştir.

Makale, klor dioksiti mikrometre boyutundaki mikroorganizmaları hızla öldürebilen, boyuta göre seçici bir antimikrobiyal madde olarak tanımlar ve hayvanlar ile insanlar gibi daha büyük organizmaların dokularına derinlemesine nüfuz etmediği için önemli zarar vermediğini iddia eder.

Yazarlar, düşük derişimlerde kısa süre kullanıldığında güvenli olduğunu ileri sürmektedir. Bununla birlikte, antibiyotik dirençli mikroorganizmalar için uygun doz ve protokollerin belirlenmesi amacıyla klinik çalışmalar gerektiğini de belirtmektedir.

Çalışmanın tamamını buradan indirin:

Giriş

Araştırmaya dahil edilen beş antibiyotik dirençli bakteri şunlardır: Escherichia coli (koli basili), metisiline dirençli Staphylococcus aureus (stafilokok), Klebsiella pneumoniae (pnömoni klebsiellası), Acinetobacter baumannii (asinetobakter) ve Pseudomonas aeruginosa (psödomonas aeruginosa).

Dünya Bankası Grubu 2017 yılında, ilaca dirençli enfeksiyonların 2050’ye kadar 2008 küresel mali krizine benzer büyüklükte ekonomik hasar oluşturabileceği konusunda uyarıda bulunmuştur.

AMR, Birleşmiş Milletler’in Sürdürülebilir Kalkınma Amaçlarının, özellikle sağlık ve esenlikle ilgili hedeflerin gerçekleştirilmesini de tehdit etmektedir.

2007 yılında hastane maliyetleri 900 milyon avronun üzerinde, ayakta tedavi maliyetleri 10 milyon avro, iş gücü verimlilik kaybı ise 150 milyon avro olarak tahmin edilmiştir.

Enfeksiyona bağlı ölümlerden kaynaklanan verimlilik kaybının ayrıca yılda yaklaşık 450 milyon avro olduğu hesaplanmıştır. 2019 Küresel Bakteriyel Antimikrobiyal Direnç Yükü raporunun verileri kullanıldığında bu ekonomik yük daha yüksek olabilir.

Dirençli bakterilerin yaygınlığı ve antibiyotiklerin giderek daha az etkili olması nedeniyle yazarlar, bu patojenlerle mücadelede yeni ve yenilikçi yöntemlerin araştırılmasını gerekli görmektedir.

KLOR DİOKSİT NEDİR? ELEŞTİRENLER İÇİN CANLI VİDEO.

https://rumble.com/embed/v2cn3t6/?pub=4

Yazarlar klor dioksiti, ek direnç oluşturmadan dirençli bakterileri yok edebilen güvenli ve etkili bir madde olarak sunmaktadır. Farklı etki mekanizmalarına sahip yeni doğal antibakteriyel ajanların keşfi küresel bir öncelik olmaya devam etmektedir.

Antibiyotik dirençli bakterilerin tedavisi: 1940’ta penisilinin keşfinden bu yana 150’den fazla antibiyotik geliştirilmiş olsa da bakteriler mevcut ilaçların çoğuna karşı direnç kazanmıştır.

Buna göre, 2050 yılına kadar ölüm sayısı her üç saniyede bir kişiye ulaşabilir.

Bakteriler son elli yılda geliştirilen antibiyotiklerin neredeyse tamamına karşı direnç geliştirmiştir.

Antibiyotik kullanımı ile direnç yaygınlığı arasında pozitif bir ilişki bulunmaktadır; tüketimin yüksek olduğu ülkelerde direnç oranları da genellikle daha yüksektir.

Bir neden, bakteriyel olmayan virüs veya mantar enfeksiyonlarında antibiyotiklerin uygunsuz şekilde reçete edilmesidir.

Aşırı antibiyotik kullanımının, hatalı reçeteleme ve antibiyotik tedavisinin uygunsuz uygulanmasıyla bağlantılı olduğu düşünülmektedir.

Antibiyotiklerin sorumsuzca kullanımı direncin temel sorunlarından biridir. Bütün antimikrobiyal ilaçlarda direncin kademeli artışı bu ilaçların etkinliğini azaltmaktadır.

Direnç artışı, mikropların antibiyotiklere maruz kalması ile dirençli mikroorganizmaların ve direnç mekanizmalarının yayılmasının birleşiminden kaynaklanmaktadır.

Antibiyotikler yalnızca daha az etkili hâle gelmekle kalmayıp özellikle bağırsaklarda veya ikincil enfeksiyon bölgelerinde disbiyoza da yol açabilir.

Antibiyotik kürlerinin aşırı tekrarı doğal bağırsak florasını ciddi biçimde bozabilir ve insan sağlığını olumsuz etkileyebilir.

İlaç şirketleri, düşük pazar getirisi, kullanım kısıtlamaları, bilimsel zorluklar ve mevcut düzenlemeler gibi nedenlerle antibiyotik geliştirmeye yatırım yapmaktan çekinmektedir.

Yeni antibiyotiklerin bulunması ve ilaç olarak geliştirilmesi uzun ve pahalı bir süreçtir.

Yeni bir ilacın piyasaya sunulması 800 milyon ile 1 milyar dolar arasında maliyet gerektirir; klinik kullanıma ulaşması ortalama on yıldan uzun sürer.

AMR ile mücadelede zaman baskısı olduğundan antibiyotik tedavisine alternatiflerin araştırılmasında farklı bir yaklaşım gerekmektedir.

2019 Global Burden of Diseases, Injuries, and Risk Factors Study (GBD) verilerine göre, enfeksiyonun olmadığı varsayımsal karşılaştırma esas alındığında AMR, GBD üçüncü düzey ölüm nedenleri arasında üçüncü sırada yer alacaktı; o yıl yalnızca iskemik kalp hastalığı ve inme daha fazla ölüme neden olmuştur.

Birçok hastane patojeni rutin temizlikle giderilemeyebilir; dolayısıyla hastanelerde, kapalı ortam havasında ve yüzeylerde uzun süre kalarak enfeksiyonların bulaşmasına katkıda bulunabilir.

Alternatif tedaviler umut vadeden bir araştırma alanıdır. Bu çalışma, MRSA, E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, A. baumannii ve P. aeruginosa gibi dirençli mikroorganizmalara karşı ek direnç oluşturmamayı hedefleyen doğal maddelerin araştırılmasına dayanmaktadır.

Yeni etki mekanizmalarına sahip doğal antibakteriyel maddelerin keşfi dünya çapında önemli bir önceliktir.

Doğal antimikrobiyal maddeler bakteriyel enfeksiyonların tedavisinde kullanılmış ve insanlık tarihi boyunca ilaçların önemli bir kaynağı olmuştur.

Tıbbi bitkiler dahil doğal ürünler bugün de yaygındır; dünya nüfusunun yaklaşık %80’inin bakımının bir parçası olarak bitkisel ürünler ve ilgili takviyeleri kullandığı tahmin edilmektedir.

Rosmarinus officinalis, Mangifera indica L. (Anacardiaceae), antimikrobiyal peptitler, bitkisel uçucu yağlar ve bunların karışımları, bu çalışmada incelenen beş AMR bakterisi dahil çeşitli patojenlere karşı etkinlik göstermiştir.

Araştırma, 5 ml’lik bir ampulde 2.990 ppm klor dioksit içeren CDSpure ampullerinin MRSA, E. coli, K. pneumoniae, A. baumannii ve P. aeruginosa üzerindeki in vitro etkisini incelemektedir.

Beş antimikrobiyal dirençli bakterinin önemi — Acinetobacter baumannii: Gram-negatif, kesin aerobik, fermentasyon yapmayan, hareketsiz, katalaz pozitif ve oksidaz negatif bir bakteridir.

A. baumannii toplam bakteriyemi vakalarının nispeten küçük bir bölümünden sorumlu olsa da çoklu ilaç direnci dünya çapında önemli bir sorundur.

Dünya genelinde suşların %71’inden fazlasının çoklu ilaca dirençli olduğu bildirilmektedir.

Amerika Birleşik Devletleri’nde mekanik ventilasyondaki hastaların %27’sinde çoklu ilaca dirençli A. baumannii kolonizasyonu saptanmıştır.

A. baumannii, kromozomal beta-laktamazlar, dışa atım pompaları ve aminoglikozit değiştirici enzimler dahil farklı direnç mekanizmaları kullanır.

İnsan serum albüminine maruz kaldıktan sonra A. baumannii beta-laktamaz transkripsiyonunu düzenler; bu, serumda doğal direnç mekanizmalarını düşündürebilir.

Çoklu dirençli A. baumannii enfeksiyonlarının yayılması nedeniyle bu patojene karşı etkili antibiyotik sayısı sınırlıdır.

Çeşitli raporlar A. baumannii’nin antimikrobiyal direnci hızla geliştirebildiğini ve birçok ilaca dirençli suşların izole edildiğini göstermiştir.

Dünya Sağlık Örgütü A. baumannii’yi acilen yeni antibiyotik gerektiren kritik öncelikli patojenler arasında sınıflandırmıştır.

Escherichia coli: İdrar yolu enfeksiyonları ve bakteriyemiye neden olan E. coli suşları çoğu zaman birden fazla antimikrobiyal sınıfa dirençlidir ve direnç oranı %50’yi aşabilir.

E. coli, çevrede yaygın bulunan, doğal ve rastlantısal genetik değişikliklere uyum sağlayabilen Gram-negatif bir bakteridir.

Boyutu 1–3 × 0,4–0,7 μm, metinde belirtilen hacmi ise 0,6–0,7 μm’dir.

Klebsiella pneumoniae (pnömoni klebsiellası)

Klebsiella pneumoniae suşları genellikle fırsatçı, hipervirülan (hyKp) veya çoklu ilaca dirençli (MDR) olarak sınıflandırılır.

Klasik K. pneumoniae (cKp) genellikle hastane enfeksiyonlarıyla ilişkilidir. Hipervirülan suşlar ise toplumda da ortaya çıkabilir ve sağlıklı bireyler dahil her yaştan kişiyi enfekte edebilir.

Çoklu dirençli K. pneumoniae suşlarının hızla yayılması, yüksek hastalık ve ölüm oranlarına sahip birçok hastane enfeksiyonundan sorumlu olmaları nedeniyle küresel sağlık için ciddi bir tehdittir.

Klebsiella pneumoniae, Gram-negatif, kapsüllü ve hareketsiz bir bakteridir.

Metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA), hastanelerde tedavisi zor enfeksiyonlara neden olan en tehlikeli patojenlerden biri kabul edilir; hastane kaynaklı MRSA (HA-MRSA) bu gruba dahildir.

Son 20–25 yıl içinde MRSA toplum ortamlarında da izole edilmiş ve toplum kökenli MRSA (CA-MRSA) tanımı ortaya çıkmıştır.

MRSA, en sık deri ve deri altı dokularını etkiler; ayrıca osteomiyelit, menenjit, pnömoni ve akciğer apsesi gibi invaziv enfeksiyonlara yol açabilir.

MRSA kaynaklı enfektif endokardit, diğer etkenlere göre daha yüksek hastalık ve ölüm oranlarıyla ilişkilidir ve damar içi uyuşturucu kullanımıyla bağlantılıdır.

Metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA), katalaz ve koagülaz pozitif Gram-pozitif bir koktur.

Pseudomonas aeruginosa (psödomonas aeruginosa)

Bakteri Pseudomonas aeruginosa hastane kaynaklı bakteriyeminin başlıca beş nedeninden biridir ve sıklıkla sepsise yol açar.

P. aeruginosa, ölüm oranı %40’a ulaşabilen ağır akut ve kronik enfeksiyonlara neden olan önemli bir Gram-negatif fırsatçı patojendir.

P. aeruginosa’yı tedavisi zor bir patojen yapan özellik, mevcut antibiyotiklerin çoğuna karşı yüksek doğal ve kazanılmış direncidir.

Bu fırsatçı patojen, özellikle bağışıklık sistemi zayıf kişilerde hayatı tehdit eden enfeksiyonlara neden olabilir; kistik fibrozis hastalarında da önemli bir hastalık ve ölüm nedenidir.

Antimikrobiyal klor dioksit (ClO2): Havada hızla ayrışabilen sarı ila kırmızımsı sarı renkli bir gazdır.

Klor dioksitin molekül ağırlığı 67,452 g/mol, deniz seviyesinde 25 °C ve 34,5 mm Hg koşullarında suda çözünürlüğü yaklaşık 3,01 g/L (3.000 ppm)’dir.

0,1 ppm kadar düşük derişimlerde ve geniş bir pH aralığında biyosidal etki gösterir; soğuk suda bile klordan on kat daha iyi çözünür.

Klor dioksit ozon ve klora göre daha düşük oksidasyon potansiyeline sahiptir.

Optimum pH 6,0–10,0 arasındadır; metne göre pH 8,0’ın üzerinde mikroorganizmalara karşı genellikle klordan daha etkilidir.

Suda reaksiyona girdiğinde, bakterileri ve mikroorganizmaları öldürebilen oldukça reaktif klorit iyonları oluşturur.

Klor dioksit bakteri, virüs ve Giardia’yı hızla öldürür ve Cryptosporidium’a karşı etkilidir.

Ayrıca tat ve kokuyu iyileştirir, sülfürleri ve fenolleri parçalar, algleri kontrol eder ve demir ile mangan iyonlarını etkisizleştirir.

Geniş bir pH aralığında 0,1 ppm kadar düşük derişimlerde etkili bir biyosittir.

https://rumble.com/embed/v12fdcz/?pub=4

Klor dioksit, biyofilmler ve direnç.

Makale, klor dioksitin biyofilmlere nüfuz edip onları parçalayabildiği için tedavi amaçlı kullanıma daha uygun olduğunu iddia eder.

Simpson ve arkadaşlarına (1993) göre klor dioksit suda çok iyi çözüldüğünden biyofilmleri hızlı bir şekilde uzaklaştırabilir.

Ozonun aksine biyofilmin hücre dışı polisakkaritleriyle reaksiyona girmediği, böylece içindeki mikroplara hızla ulaşabildiği ileri sürülmektedir.

Mikroorganizmaları yok etmek için biyofilmlere nüfuz etmek, hem doğal hem de geleneksel tıp açısından önemli bir zorluktur.

Biyofilm, mikrobiyal hücrelerin çeşitli fizyolojik ve çevresel koşullarda canlı ya da cansız yüzeylere tutunmasıyla oluşan üç boyutlu bir yapıdır.

Bu hücreler sürekli çoğalır ve çevrelerindeki matrisi oluşturan hücre dışı polimerik maddeler (EPS) üretir.

Biyofilmler, canlı ya da cansız yüzeylerde mikroorganizmaların kendi ürettikleri ekzopolisakkarit matrisiyle çevrili hücre kümeleridir.

Serbest hücrelerle karşılaştırıldığında biyofilmler antibiyotiklere, konak bağışıklığına ve olumsuz çevre koşullarına karşı önemli koruma sağlar.

İnsan enfeksiyonlarının %65–80’inin biyofilm oluşturan bakterilerden kaynaklandığı tahmin edilmektedir.

Biyofilmlerin serbest hücrelere göre antibiyotiklere 1.000 kat daha dirençli olduğu tahmin edilmektedir.

Bakteri hücreleri ile çevresel faktörlerin etkileşimi biyofilm oluşumunu tetikler.

Klor dioksitin biyofilmlere girip onları yok edebilmesi, yazarların gözünde birçok antibiyotiğe karşı önemli bir avantajdır.

Yazarların öne sürdüğü bir diğer avantaj, bakterilerin klor dioksite karşı antibiyotiklerde olduğu gibi direnç geliştirememesidir.

Sistein, metiyonin, tirozin ve triptofan olmak üzere dört amino asit, özellikle sistein ve biyolojik tiyoller, mikroplar dahil tüm canlı sistemlerde önemli rol oynar. Yazarlar buradan hareketle mikroorganizmaların klor dioksite direnç geliştiremeyeceğini ileri sürmektedir.

Klor dioksit bakteri hücre duvarından geçerek sitoplazmadaki yaşamsal amino asitlerle reaksiyona girer ve mikroorganizmanın ölümüne yol açabilir.

Bu reaksiyonun yan ürünü klorittir; makalede bunun çevre veya insan sağlığı için bilinen önemli bir risk oluşturmadığı belirtilmektedir.

Klor dioksitin güvenliği ve etkinliği

ABD Çevre Koruma Ajansı (EPA), klor dioksitin sıvı biçimini ilk kez 1967 yılında dezenfektan olarak tescil etmiştir.

Yazarlar klor dioksiti mikrometre ölçeğindeki organizmaları öldürebilen boyuta duyarlı antimikrobiyal madde olarak tanımlamakta; hayvanlar ve insanlar gibi büyük organizmaların dokularına derinlemesine nüfuz edemediği için önemli zarar veremeyeceğini iddia etmektedir.

Metne göre, klor dioksit büyük organizmaların dokularına derinden nüfuz edemez ve bu organizmaların dolaşım sistemi sürekli antioksidan sağlayarak oksidatif etkilere karşı koruma sunar.

 Başka araştırmaların, klor dioksitin 1–100 ppm derişimlerde mikroorganizmaları baskılayabildiğini veya yok edebildiğini ve duyarlı virüslerin en az %99,9’unu 15 saniyede etkisiz hâle getirdiğini gösterdiği belirtilmektedir.

Georgiou (2021), klor dioksitin MRSA büyümesini in vitro koşullarda düşük derişimlerde bile %99,99–100 oranında engellediğini bildirmiştir.

Innerlight Biyolojik Araştırmalar Vakfındaki çalışmalar, yirmi beş yılı aşkın süredir klor dioksitin sporlar, bakteriler ve virüslere karşı olası klinik uygulamalarını incelemektedir.

Metin; Epstein–Barr virüsü (EBV), sitomegalovirüs (CMV), hepatit A ve B virüsleri, HIV ve diğer enfeksiyonlara ilişkin klinik uygulamalardan söz etmektedir.

BOLİVYA Parlamentosu 14 Ekim 2020’de klor dioksitin COVID-19’a karşı kullanımına izin verdiği belirtilen bir yasa tasarısını (ley 1351) kabul etmiştir.

Klor dioksitin Bolivya, Meksika, Peru, Brezilya ve Kolombiya gibi ülkelerde başarıyla kullanıldığı iddia edilmektedir.

Bolivya’da 2020 tarihli 1351 sayılı yasa kabul edilmiştir (Bolivya Resmî Gazetesi, 2020). Düzenleme COVID-19 salgını sırasında klor dioksit çözeltisinin üretimi, pazarlanması, temini ve kullanımını ele almaktadır.

2021 yılında Insignares Carrione tarafından yapılan ve COVID-19 tedavisinde ağızdan alınan klor dioksitin etkinliğini araştıran çalışmada, yazarlar etkili olduğunu düşündükleri sonuçlar bildirmiştir.

Klor dioksit üç atom içerir; metin bu bağı “kararsız” veya “negatif yüklü” iyon olarak tanımlamaktadır.

Metinde, atomlar arasındaki bağın kopmasının vücuttaki patojenlerin yakınında çok küçük atom altı bir enerji darbesi oluşturduğu iddia edilmektedir.

Yazarlar, bu maddenin mikrobiyoma zarar vermeden yalnızca “asidik” ve “anaerobik” mikropları — virüsleri, bakterileri, mantarları ve parazitleri — hedeflediğini ileri sürmektedir.

Bu organizmalar oksijensiz ortamda yaşayabilir; bunların arasında çok sayıda patojen bulunmaktadır.

Metne göre anaerobik organizmalar oksijenin etkisine karşı yeterli savunma geliştirmemiştir ve hızlı şekilde etkilenebilir.

Yazarlar oksijene ihtiyaç duyan veya “alkali” nitelikteki bütün sağlıklı hücrelerin güvende olduğunu iddia etmektedir.

Klor dioksitin toksikolojisi

Şekil 1’de ABD EPA’nın içme suyu dezenfeksiyonu için verdiği referans düzeyler mavi bölgeyle gösterilmiştir.

Yeşil bölge, deney hayvanlarında toksisite görülmediği öne sürülen olası terapötik düzeyleri; kırmızı bölge ise 399 ppm üzerindeki toksik düzeyleri göstermektedir.

Yazarlar, bu çalışmada dirençli bakterilerin %99 veya daha fazlasını yok ettiği bildirilen 5 ppm düzeyini toksik olmayan olarak niteledikleri mavi/yeşil bölgede değerlendirmektedir.

Şekil 1. Tekrarlanan doz, subakut (<28 gün) veya kronik (>90 gün) çalışmalarda kullanılan klor dioksit dozu

İçme suyuna zararlı bakteri ve mikroorganizmalara karşı koruma sağlamak için klor dioksit eklenmektedir.

İnsanlar, gıda endüstrisinde de dezenfektan olarak kullanılması nedeniyle arıtılmış su ve gıdalar yoluyla az miktarda klor dioksit ve klorite maruz kalabilir.

Metinde klor dioksit veya kloritin insan üremesini etkilediğine ilişkin kanıt bulunmadığı ileri sürülmektedir.

Erkek hayvanlarda yapılan üreme çalışmalarında spermatogenez göstergeleri, morfoloji ya da hareketlilikte tutarlı değişiklikler görülmemiş; bildirilen etkilerin gelişim üzerindeki olumsuz etkilerden daha yüksek dozlarda ortaya çıktığı belirtilmiştir.

Kan parametrelerindeki değişiklikler de daha yüksek dozlarda görülmektedir. Makale, ağızdan klor dioksit maruziyeti sonrası insan ölümlerine ilişkin bilgi bulunmadığını belirtmektedir.

Scatina çalışmasında, makaleye göre, 70 gönüllü 24 ppm’e kadar klor dioksit çözeltisi içmiş ve istenmeyen etki bildirilmemiştir.

Yöntem — materyal ve metotlar

Araştırmada antibiyotik dirençli bakteriler kullanılmıştır: E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, S. pneumoniae, A. baumannii ve P. aeruginosa.

Bütün örnekler Almanya’daki sertifikalı bir laboratuvardan (ATTC) dondurulmuş tüplerde alınmış ve kanlı agar plaklarında çoğaltılmıştır.

İzole kültürlerden her bakteri örneği, sınıf II güvenlik kabininde steril bir öze yardımıyla alınmış ve 5 ml triptik soy buyonu (TSB) içeren steril tüplere aktarılmıştır.

Kültür tüpleri Heraeus inkübatöründe 37 °C’de bekletilmiştir. Uygun sayıya ulaştıklarında dondurularak kullanıma kadar −176 °C’de sıvı azotta saklanmıştır.

Bakteri sayımı

Laboratuvarlarda bakteri sayısını belirlemek için genellikle koloni oluşturan birimler sayılır; bu, hücrelerin canlılığına ilişkin genel bir fikir sağlayan basit bir yöntemdir.

Ancak sonuçların elde edilmesi günler sürebilir ve örnek hazırlama yöntemlerine ve koşullara göre farklılık gösterebilir.

Bu araştırmada Logos Biosystems tarafından geliştirilen QUANTOM Tx™ mikrobiyal hücre sayacı kullanılmıştır.

Bu, birkaç dakika içinde tek tek bakterileri tanıyıp sayabilen görüntü tabanlı otomatik bir hücre sayacıdır.

QUANTOM Tx otomatik odaklama yapar, floresan boyalı hücrelerin çok sayıda görüntüsünü alır ve bakterileri yüksek hassasiyet ve doğrulukla saptamak için analiz eder.

Sistem, yoğun kümeler içindeki tekil bakteri hücrelerini bile ayırt edebilen gelişmiş bir algılama ve ayırma algoritması içerir.

Canlı ve ölü hücreleri ayırt etmek için Viable Cell Staining Kit kullanılmıştır.

QUANTOM analizi için kültür ortamından 10 mikrolitre (μl), önceden kalibre edilmiş DLAB elektronik pipetiyle alınarak 1,5 ml’lik steril Eppendorf tüpüne aktarılmıştır.

2 μl Viable Cell Staining Dye eklenmiş, örnek Heraeus inkübatöründe 37 °C’de 30 dakika bekletilmiştir.

Floresan sinyalini artırmak üzere 8 μl tampon çözeltisi eklenmiştir.

Klor dioksit çözeltisinin hazırlanması

Deneylerde AQARIUS pro-life üretimi, 5 ml’lik ampulde 2.990 ppm klor dioksit içerdiği belirtilen CDS Pure® (CAS 10049-04-4) kullanılmıştır.

Ürün; kapalı cam ampulde, kullanıma hazır, steril, nanofiltrasyonla arıtılmış, pH açısından nötr ve serbest klor içermeyen bir çözeltisi olarak tanımlanmaktadır.

Metne göre demineralize su ve klor dioksitten oluşan çözelti kalıntı, gümüş iyonu veya nanoparçacık içermez. Ayrıca her 5 ml’lik ampul için 2.900 ppm değeri belirtilerek ihtiyaç duyulan hacimlerin hesaplandığı ifade edilmektedir.

Deneylerde klor dioksit derişimleri 1 ile 7 ppm arasında değişmiştir.

Her derişim için kullanılan hacimler şöyle verilmiştir: 1 ppm = 1,667 μl CDS Pure®, 2 ppm = 3,344 μl, 3 ppm = 5,016 μl, 4 ppm = 6,688 μl, 5 ppm = 8,336 μl, 6 ppm = 10,032 μl ve 7 ppm = 11,704 μl. Rapora göre dezenfeksiyon saniyeler içinde gerçekleştiğinden maruziyet süresi önemsiz sayılmıştır.

Bu tüplere farklı derişimlerde klor dioksit eklenmiştir.

Deneyde, 1,667 μl (1 ppm) ile 11,704 μl (7 ppm) arasında CDS çözeltisi DLAB elektronik pipetiyle tüplere eklenmiş ve her bakteri kültürü için yavaşça karıştırılmıştır.

Her deney tüpü için aynı kültür ortamından bir kontrol tüpü hazırlanmıştır.

Seyreltme oranını sabit tutmak amacıyla kontrol tüplerine eşit hacimde damıtılmış su eklenmiştir.

Kontrol ve deney tüplerinden elektronik pipetle 6 μl’lik örnekler alınarak M50 hücre sayım lamlarına yerleştirilmiştir.

Lamlar QUANTOM santrifüjünde 300 RCF’de sekiz dakika döndürülmüş, ardından kontrol ve deney ölçümleri için QUANTOM mikrobiyal hücre sayacına konulmuştur.

QUANTOM cihazının ayarları, farklı bakteri türlerinin şekil ve boyutlarına göre sayımın doğruluğunu artıracak biçimde belirlenmiştir.

Sonuçlar

Beş antibiyotik dirençli bakteri türündeki dezenfeksiyonu değerlendirmek için standart 2.990 ppm derişimli, 5 ml’lik CDSpure ampulleri kullanılmıştır.

1–7 ppm aralığında, 1 ppm’lik adımlarla deneyler yapılmıştır. Kontrol ve deney örnekleri üç kez tekrarlanmış ve her grup için ortalama değerler hesaplanmıştır.

Bu değerler, CDSpure klor dioksit içermeyen kontrol örnekleriyle karşılaştırılmıştır.

Bütün beş bakteri türünde 7 ppm’lik en yüksek derişimde %95’in üzerinde dezenfeksiyon bildirilmiş; bazı türler 4–7 ppm aralığında da ortadan kaldırılmıştır (t-testi, p<0,01).

İzleyen tablo ve şekillerde her bakteri türünün sonuçları ayrı ayrı incelenmektedir.

Acinetobacter baumannii dezenfeksiyonu: 5, 6 ve 7 ppm klor dioksit derişimlerinde %99 dezenfeksiyon bildirilmiştir (t-testi, p<0,01; Tablo 1, Şekil 2).

Klor dioksite maruziyet öncesi ve sonrası Acinetobacter baumannii bakteri sayılarının karşılaştırılması

Escherichia coli dezenfeksiyonu

E. coli için 7 ppm’de >%98 dezenfeksiyon bildirilmiştir (t-testi, p<0,01; Tablo 2, Şekil 3).

Klebsiella pneumoniae dezenfeksiyonu

K. pneumoniae için 6 ve 7 ppm’de >%94 dezenfeksiyon bildirilmiştir (t-testi, p<0,01; Tablo 3, Şekil 4).

Tablo 3: Klor dioksite maruziyet öncesi ve sonrası Klebsiella pneumoniae sayılarının karşılaştırılması
Maruziyet

Klor dioksite maruziyet öncesi ve sonrası Klebsiella pneumoniae bakteri sayılarının karşılaştırılması

Farklı klor dioksit derişimlerinde Klebsiella pneumoniae kontrol ve deney gruplarının karşılaştırılması

Metisiline dirençli Staphylococcus aureus (MRSA) dezenfeksiyonu
MRSA için 4–7 ppm derişimlerde >%99 dezenfeksiyon bildirilmiştir (t-testi, p<0,01; Tablo 4, Şekil 5).

Tablo 4: Klor dioksite maruziyet öncesi ve sonrası MRSA bakteri sayılarının karşılaştırılması.

Şekil 5. Farklı klor dioksit derişimlerinde MRSA kontrol ve deney gruplarının karşılaştırılması.

Pseudomonas aeruginosa dezenfeksiyonu: P. aeruginosa için 7 ppm’de >%95 dezenfeksiyon bildirilmiştir (t-testi, p<0,01; Tablo 5, Şekil 6).

Yazarlar, bu sonuçların klor dioksit çözeltisinin in vitro ortamda incelenen bütün antibiyotik dirençli bakteri türlerini etkili biçimde ortadan kaldırabildiğini gösterdiğini savunmaktadır.

En az %95 dezenfeksiyon için gereken klor dioksit derişimleri 4–7 ppm arasında bulunmuştur; yazarlar bunu olası güvenli aralık içinde değerlendirmektedir (Şekil 1’e bakınız).

Şekil 6. Farklı klor dioksit derişimlerinde Pseudomonas aeruginosa kontrol ve deney gruplarının karşılaştırılması.

Şekil 6. Klor dioksit kullanılarak Pseudomonas aeruginosa kontrol ve deney gruplarının karşılaştırılması farklı derişimlerde.

Tablo 5: Klor dioksite maruziyet öncesi ve sonrası Pseudomonas aeruginosa sayılarının karşılaştırılması
Maruziyet.

Tartışma

Antibiyotiklere dirençli bakterilerin artışı küresel halk sağlığı için önemli bir tehdittir. Bu bakterilerin yaygın antibiyotiklere karşı geliştirdiği direnç enfeksiyonların tedavisini zorlaştırmakta, ölüm oranlarını ve sağlık harcamalarını yükseltmektedir.

Antibiyotik dirençli hastalıklardan kaynaklanan yıllık ölümlerin 2050’ye kadar on milyonu aşarak kanserden kaynaklanan ölümleri geçebileceği tahmin edilmektedir.

Bu durum küresel sağlık için ciddi bir tehdittir; çünkü eskiden hızla tedavi edilebilen enfeksiyonlar artık uzun süreli hastalıklara, büyük acılara ve sağlık sistemleri üzerinde ağır bir yüke neden olabilir.

Dirençli bakterileri ortadan kaldırmaya yönelik alternatif yaklaşımların araştırılmasının önemi küçümsenmemelidir. Yazarlara göre bu araştırmalar şu yollarla dünya genelinde hayat kurtarabilir:

1. 1. Hasta sonuçlarını iyileştirme: Alternatif stratejiler, eskiden tedavi edilemez sayılan enfeksiyonlara karşı etkili olabilir.

Dirençli bakterilerin başarılı biçimde hedeflenmesi, hastaların durumunu iyileştirebilir, hastalık ve ölüm oranlarını azaltabilir ve dirençli enfeksiyonlarla yaşayan kişilere umut verebilir.

2. 2. Sağlık hizmetlerinin yükünü azaltma: Antibiyotik dirençli enfeksiyonların artması dünya çapında sağlık sistemlerini zorlamaktadır.

Dirençle mücadelede alternatif yöntemler bulunması kaynakların üzerindeki baskıyı azaltabilir, verimliliği artırabilir, hastanede kalış sürelerini ve maliyetleri düşürebilir.

3. 3. Salgınları önleme: Kontrol edilmezse dirençli bakteriler geniş çaplı salgınlara neden olabilir.

Alternatif yaklaşımlara yönelik araştırmalar, dirençli suşların ortaya çıkmasını ve yayılmasını önlemeye, böylece halk sağlığını korumaya katkıda bulunabilir.

4. 4. Tedavi seçeneklerini çeşitlendirme.

Yeni ve doğal tedaviler antibiyotik direncine karşı farklı yaklaşımlar sunabilir.

Sağlık çalışanlarının kullanabileceği tedavi seçeneklerini genişleterek dirençli enfeksiyonlarla mücadelede ek araçlar sağlayabilirler.

Bu çeşitlilik başarılı tedavi olasılığını artırabilir ve geleneksel antibiyotiklerin sınırlamalarını aşmaya yardımcı olabilir.

5. 5. Direnç mekanizmalarını aşma: Bakteriler geleneksel antibiyotiklerin etkisinden kaçınmak için karmaşık mekanizmalar geliştirmiştir.

Yeni ve doğal yöntemler bakterileri farklı yollardan hedefleyerek mevcut direnç mekanizmalarını aşabilir ve tedavinin başarısız olma riskini azaltabilir.

6. 6. Daha az yan etki ve toksisite: Pek çok geleneksel antibiyotik, özellikle uzun süre kullanıldığında istenmeyen etkilere ve toksisiteye yol açabilir.

Yazarlar, klor dioksit dahil doğal maddelerin daha düşük toksisite ve daha az yan etki sağlayabileceğini varsaymakta; bu hipotezin çocuklar, hamileler ve yaşlılar gibi hassas gruplar için önemli olduğunu belirtmektedir.

7. 7. Bağırsak mikrobiyomunu koruma: Geleneksel antibiyotikler yararlı bağırsak bakterilerinin dengesini bozarak disbiyoz ve olası uzun süreli sağlık sorunları yaratabilir.

Yeni ve doğal yaklaşımlar zararlı bakterileri seçici olarak ortadan kaldırırken bağırsak mikrobiyomunun çeşitliliğini ve işlevlerini koruma potansiyeline sahip olabilir.

Bu önemlidir; çünkü sağlıklı bağırsak mikrobiyomu bağışıklık, sindirim ve genel esenlik açısından önemli rol oynar.

8. 8. Sürdürülebilir ve çevre dostu çözümler: Geleneksel antibiyotiklerin üretimi ve kullanımı çevrede dirençli bakteri türlerinin ortaya çıkması dahil olumsuz etkiler yaratabilir.

Doğal tedaviler çoğu zaman bitkiler veya mikroorganizmalardan elde edilen bileşikler gibi yenilenebilir kaynaklara dayanır ve sürdürülebilir biçimde üretilebilir. Bazıları daha kolay parçalanarak uzun vadeli çevre zararlarını azaltabilir.

9. 9. Kombine tedavi olanağı: Doğal yöntemler, sinerjik etki ve daha iyi sonuçlar elde etmek için geleneksel antibiyotikler veya diğer tedavilerle birlikte kullanılabilir.

Böyle bir yaklaşım, her yöntemin olası yararlarını dikkate alan kişiye özel tedavi programlarına imkân verir.

Kombine tedaviler dirençli bakterilerle mücadelede daha etkili olabilir, tedavi süresini kısaltabilir ve ek direnç gelişimini önleyebilir.

10. 10. Ulaşılabilir ve ekonomik tedavi seçenekleri: Dünyanın birçok yerinde geleneksel antibiyotiklere erişim sınırlı ya da pahalıdır.

Yerel kaynaklardan üretilen doğal yöntemler dirençli enfeksiyonların tedavisinde daha kolay ulaşılabilir ve hesaplı seçenekler sunabilir.

Bu durum, kaynakların kıt ve antibiyotik direncinin yaygın olduğu bölgelerde küresel sağlık açısından büyük önem taşıyabilir.

Yazarlar klor dioksiti antibiyotik dirençli bakterilerin ortadan kaldırılması için umut vadeden bir alternatif olarak sunmaktadır.

Metne göre madde bakterilerin hücre yapılarını bozarak çoğalmalarını ve daha fazla hasara yol açmalarını engeller.

Klor dioksitin avantajları

Klor dioksit, bu dirençli patojenlerle mücadelede olası yararlı bir araç olarak tanıtılmaktadır.

Geniş etki alanı, kalıcı etkinliği, direnç gelişme riskinin düşük olduğu iddiası ve çevresel özellikleri başlıca avantajları olarak sıralanmaktadır.

Yazarlar, klor dioksitin kapsamlı enfeksiyon kontrol stratejilerine eklenmesinin ölüm oranlarını azaltabileceğini, halk sağlığını koruyabileceğini ve antibiyotik direnciyle mücadeleye yardımcı olabileceğini düşünmektedir.

Antibiyotik dirençli bakterilere karşı kullanımının yararları arasında geniş spektrumlu etkinlik de sayılmaktadır: Çalışmada MRSA ve diğer dirençli suşlara karşı etkinlik bildirilmektedir.

Bakteri hücre duvarını hedefleme ve temel metabolik süreçleri bozma özelliği, onu bir antimikrobiyal madde olarak tanımlamaktadır.

Kalıcı etkinlik: Bazı geleneksel dezenfektanların aksine, klor dioksit ilk uygulamadan sonra da yüzeyleri koruyabilecek kalıntı etki gösterebilir.

Bu etki, yüzeylerin hızla kirlenebildiği sağlık kuruluşlarında önemlidir ve bakteri kolonizasyonu ile bulaşa karşı daha uzun süreli koruma sağlayabilir.

Direnç gelişimi olasılığının azalması:

Yazarlar klor dioksitin etki mekanizmasının bakterilerde direnç gelişme olasılığını azalttığını ileri sürmektedir.

Belirli bakteriyel yapılara etki eden antibiyotiklerden farklı olarak klor dioksit aynı anda birden çok hücresel yapıya saldırdığı için bakterilerin direnç geliştirmesini zorlaştırabilir.

Biyofilmlerin ortadan kaldırılması: Araştırmalar klor dioksitin biyofilmlere nüfuz edip onları parçalayabildiğine işaret etmektedir.

Biyofilmlerdeki bakterilerin serbest hücrelerden 1.000 kat daha fazla antibiyotik direnci gösterebildiği tahmin edilmektedir.

Çevresel güvenlik:

Metinde klor dioksit, toksik kalıntı bırakmadan zararsız yan ürünlere parçalanan, çevre açısından olumlu özelliklere sahip bir madde olarak tanımlanmaktadır.

Yazarlara göre bu özellik, dezenfeksiyon amaçlı kullanımının uzun vadeli çevresel zarara katkıda bulunmaması anlamına gelir.

Olası etkiler:

Klor dioksitin antibiyotik dirençli bakterilerin ortadan kaldırılmasındaki potansiyel öneminin çok yüksek olduğu vurgulanmaktadır.
Yazarlar alternatif bir tedavi seçeneği olarak direncin ve ölüm oranlarının azaltılmasına, sağlık sistemlerinin yükünün hafifletilmesine katkı sağlayabileceğini düşünmektedir.

MRSA ve diğer dirençli suşlara karşı etkinliğinin hasta sonuçlarını iyileştirebileceği, hastanede kalışı ve sağlık harcamalarını azaltabileceği ileri sürülmektedir.

Maliyet etkinliği:

Klor dioksit çözeltisi ucuzdur ve yazarlara göre zamanla bir ülkenin sağlık harcamalarını önemli ölçüde azaltabilir.

Sonuçlar

Bu araştırma, dünya çapında çok sayıda ölümle ilişkili bazı önemli antibiyotik dirençli bakterilere karşı klor dioksitin in vitro etkinliğini incelemiştir.

Yazarlar, in vitro koşullarda neredeyse tam dezenfeksiyon için en uygun derişimin 7 ppm olduğunu bildirmektedir (p<0,01).

Metin, bu derişimi su arıtımında kullanılan düzeylerle karşılaştırarak ağızdan alım açısından güvenli olarak nitelemektedir.

Yazarlar, in vitro görülen etkinin insan vücudunda da görülebileceğini varsaymaktadır.

Makalede klor dioksitin laktik asit veya mikroorganizmaların asitliği gibi asidik ortamlara temas ettiğinde oksijen saldığı iddia edilmektedir.

Yazarlar, klor dioksitin parçalanınca kana oksijen verdiğini, bunu alyuvarların davranışı ve Bohr etkisiyle karşılaştırarak açıklamaktadır.

Klor dioksit, mikroskobik organizmaları öldürebilen boyuta duyarlı bir antimikrobiyal madde olarak tanımlanmakta; yazarlar büyük organizmaların dokularına derinlemesine işlemediği için insanlara veya hayvanlara gerçek zarar vermediğini savunmaktadır.

Klor dioksit kullanımı etrafında çok sayıda tartışma yaşanmıştır.

Diğer maddelerde olduğu gibi maruziyetin sonuçları uygulama yoluna (soluma, topikal veya ağızdan), maddenin fiziksel hâline, derişimine, maruziyet süresine, kişisel özelliklere ve diğer kimyasalların veya safsızlıkların varlığına bağlıdır.

Yazarlar, yıllar içinde insanlar ve hayvanlarda yapılan çok sayıda toksikoloji çalışmasının belirli maruziyet düzeylerinde güvenlik ve etkinliğe işaret ettiğini ileri sürmektedir.

Metinde, mikropları öldürmek için gereken düşük dozlarda uygun şekilde kullanıldığında klor dioksitin güvenli olduğu iddia edilmektedir.

Makale, Insignares–Carrione tarafından 2021’de COVID-19 için yapıldığı belirtilen ve hastalara damardan saflaştırılmış klor dioksit CDS (2.990 ppm) verildiği bildirilen çalışmaların olumlu sonuçlarından söz etmektedir.

Ayrıca Bolivya’da 2020 yılında COVID-19’u önleme ve tedavi amacıyla klor dioksit çözeltilerine ilişkin yasal düzenlemelerin kabul edildiği belirtilmektedir.

Yazarlara göre Bolivya Sağlık Bakanlığının onayıyla bir etik kurul oluşturulmuş ve farklı uygulamalar hakkında klinik ve bilimsel araştırmalar yürütülmüştür.

Makalede klor dioksitin Epstein–Barr virüsü (EBV), sitomegalovirüs (CMV), hepatit A ve B, HIV ve başka enfeksiyonlara karşı klinik olarak kullanıldığı iddia edilmektedir.

Başka araştırmalar sporlar, bakteriler ve virüslere karşı klor dioksitin olası klinik kullanımını incelemektedir.

Yıllar boyunca klor dioksitin kullanımı hakkında gönüllülerden yüzlerce ek tanıklık Jim Humble tarafından çeşitli uygulamalar için derlenmiştir.

Klinik uygulamalarda hangi yöntemlerin daha iyi sonuç vereceğini belirlemek için klinik deneylere ihtiyaç vardır.

Metin, damar içi infüzyon uygulayan hekimlerin 5 ml’lik CDSpure (2.990 ppm) ampullerini doğrudan veya gerekli düzeye seyreltildikten sonra ağızdan kullanabileceğini öne sürmektedir.

Çıkar çatışması: Yok
Finansman beyanı: Yok

Araştırmanın Scribd üzerindeki özgün biçimi.

Eradication of Antibiotic Resistant Bacteria Using Chlorine Dioxide.

Eradication of Antibiotic Resistant Bacteria Using Chlorine Dioxide by sfagi on Scribd

(function() { var scribd = document.createElement(“script”); scribd.type = “text/javascript”; scribd.async = true; scribd.src = “https://www.scribd.com/javascripts/embed_code/inject.js”; var s = document.getElementsByTagName(“script”)[0]; s.parentNode.insertBefore(scribd, s); })();

Yayımlanma yılı: 2023
Kaynak: Georgiou G., Kotzé A. ve diğerleri, 2023. Eradication of Antibiotic-Resistant E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, S. pneumoniae, A. baumannii, and P. aeruginosa with Chlorine Dioxide In Vitro, Medical Research Archives, [online] 11(6).
https://doi.org/10.18103/mra.v11i7.2.4218
Telif hakkı: © 2023 European Society of Medicine. Bu açık erişimli makale, sınırsız kullanıma izin veren Creative Commons Attribution Lisansı koşulları altında dağıtılmaktadır;
her ortamda dağıtım ve çoğaltmaya, özgün yazar ve kaynak belirtilmesi şartıyla izin verilir.
DOI
https://doi.org/10.18103/mra.v11i7.2.4218
ISSN: 2375-1924

ARAŞTIRMA MAKALESİ
Antibiyotiklere dirençli E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, S. pneumoniae, A. baumannii ve P. aeruginosa’nın klor dioksit ile in vitro ortadan kaldırılması
Georgios Georgiou — baş araştırmacı — admin@docgeorge.com
Agnieszka Kotzé — araştırmacı — aggie.kotze@gmail.com

Published: June 30, 2023
Citation: Georgiou G, Kotzé A, et al., 2023. Eradication of Antibiotic-Resistant E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, S. pneumoniae, A. baumannii, and P. aeruginosa with Chlorine Dioxide In Vitro, Medical Research Archives, [online] 11(6).
https://doi.org/10.18103/mra.v11i7.2.4218
Copyright: © 2023 European Society of Medicine. This is an open-access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License, which permits unrestricted use,
distribution, and reproduction in any medium, provided the original author and source are credited.
DOI
https://doi.org/10.18103/mra.v11i7.2.4218
ISSN: 2375-1924

RESEARCH ARTICLE
Eradication of Antibiotic-Resistant E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, S. pneumoniae, A. baumannii, and P. aeruginosa with Chlorine Dioxide In Vitro
George Georgiou – Principal Investigator – admin@docgeorge.com
Agnieszka Kotzé – Researcher – aggie.kotze@gmail.com