Eliminazione dei batteri resistenti agli antibiotici mediante biossido di cloro
Come il biossido di cloro distrugge ed elimina anche i batteri più resistenti agli antibiotici. Uno studio.
Il biossido di cloro, MMS – Soluzione Minerale Miracolosa, elimina i batteri resistenti agli antibiotici. Ricerca scientifica – studio.
RIASSUNTO
La resistenza batterica agli antibiotici (AMR) rappresenta un problema in tutte le regioni. Sei patogeni sono responsabili del 73,4% dei decessi attribuibili all’AMR batterica: Escherichia coli (E. coli), Staphylococcus aureus (S. aureus), Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae), Streptococcus pneumoniae (S. pneumoniae), Acinetobacter baumannii (A. baumannii) e Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa).
L’Organizzazione mondiale della sanità ha avviato nel 2021 un Piano d’azione globale contro l’AMR, tuttora attivo. I costi sanitari legati all’antibiotico-resistenza ammontano a molti miliardi di dollari nel mondo.
Una revisione della resistenza antimicrobica commissionata dal governo britannico ha suggerito che entro il 2050 l’AMR potrebbe causare 10 milioni di morti all’anno ed è diventata una delle maggiori minacce alla salute pubblica del XXI secolo.
Un solo patogeno resistente, lo Staphylococcus aureus resistente alla meticillina (MRSA), ha causato oltre 100.000 decessi nel mondo; anche gli altri patogeni considerati in questa ricerca sono responsabili di numerosi morti.
Questa ricerca si è concentrata sull’efficacia del biossido di cloro nell’eliminare in vitro cinque diversi batteri resistenti agli antibiotici, come possibile nuovo trattamento.
Lo studio ha impiegato diverse concentrazioni di biossido di cloro, comprese tra 1 e 7 ppm, contro cinque batteri resistenti agli antibiotici. Le prove di disinfezione sono state confrontate con campioni di controllo e i risultati hanno indicato una disinfezione superiore al 95% alla concentrazione di 7 ppm.
Il biossido di cloro viene descritto come un agente antimicrobico selettivo in base alle dimensioni, capace di uccidere rapidamente organismi di dimensioni micrometriche senza, secondo gli autori, provocare danni significativi a organismi molto più grandi, come animali e uomini, perché non penetrerebbe in profondità nei tessuti viventi.
L’articolo presenta come sicura un’esposizione breve a basse concentrazioni. Gli autori chiedono studi clinici per stabilire dosaggi e protocolli ottimali per eliminare microrganismi resistenti agli antibiotici dall’organismo.
Scarica lo studio qui:
Introduzione
I cinque batteri resistenti agli antibiotici inclusi nella ricerca erano Escherichia coli (E. coli), Staphylococcus aureus resistente alla meticillina (infezione da stafilococco), Klebsiella pneumoniae (Klebsiella della polmonite), Acinetobacter baumannii (Acinetobacter) e Pseudomonas aeruginosa.
Nel 2017 il Gruppo Banca mondiale ha avvertito che, entro il 2050, le infezioni resistenti ai farmaci potrebbero causare danni economici globali paragonabili alla crisi finanziaria del 2008.
L’AMR minaccia inoltre il raggiungimento di diversi Obiettivi di sviluppo sostenibile delle Nazioni Unite, in particolare quelli relativi alla salute e al benessere.
Nel 2007 i costi ospedalieri sono stati stimati in oltre 900 milioni di euro; quelli ambulatoriali in 10 milioni e la perdita di produttività lavorativa in 150 milioni di euro.
Inoltre, le perdite di produttività dovute ai decessi causati dalle infezioni sono state stimate in circa 450 milioni di euro all’anno. Sulla base dei dati del rapporto Global Burden of Bacterial Antimicrobial Resistance in 2019, questi costi economici sarebbero notevolmente più elevati.
Considerata la diffusione mondiale dei batteri resistenti e la progressiva diminuzione dell’efficacia degli antibiotici, è ritenuta essenziale la ricerca di metodi più naturali e innovativi per combattere tali patogeni.
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L’articolo presenta il biossido di cloro come un metodo sicuro ed efficace per eliminare i batteri resistenti senza generare ulteriore resistenza. La scoperta di nuovi agenti antibatterici naturali con meccanismi d’azione innovativi rimane una priorità mondiale.
Trattamento dei batteri resistenti agli antibiotici. Dalla scoperta della penicillina nel 1940 sono stati sviluppati oltre 150 antibiotici e i batteri hanno sviluppato resistenza alla maggior parte degli antibiotici disponibili.
Su questa base, entro il 2050 il numero di decessi potrebbe essere impressionante: una persona ogni tre secondi.
I batteri hanno sviluppato resistenza a quasi tutti gli antibiotici introdotti negli ultimi 50 anni.
Esiste una correlazione positiva tra l’uso degli antibiotici e la prevalenza della resistenza, con percentuali più alte nei paesi dove il consumo è maggiore.
La prescrizione inappropriata si verifica quando i medici prescrivono erroneamente antibiotici per infezioni virali o fungine anziché batteriche.
Si ipotizza che l’abuso di antibiotici sia associato alla prescrizione e alla somministrazione inadeguate di terapie antibiotiche.
L’uso irresponsabile degli antibiotici è una delle cause fondamentali dell’antibiotico-resistenza. Questi farmaci diventano sempre meno efficaci a causa dell’aumento progressivo della resistenza agli antimicrobici.
L’aumento della resistenza è dovuto sia all’esposizione dei microrganismi agli antibiotici sia alla diffusione dei microrganismi resistenti e dei loro meccanismi di resistenza.
Gli antibiotici non solo stanno diventando meno efficaci, ma possono anche provocare disbiosi, soprattutto nell’intestino o nei siti di infezioni secondarie.
Le conseguenze sulla salute umana possono essere gravi: l’uso eccessivo e ripetuto di antibiotici ha dimostrato di distruggere gran parte della flora intestinale naturale.
Le aziende farmaceutiche sono inoltre restie a investire nello sviluppo di antibiotici per vari motivi, tra cui scarsa redditività, limitazioni d’uso, difficoltà scientifiche e quadro normativo vigente.
Scoprire nuovi antibiotici e svilupparli come medicinali richiede tempi lunghi e costi elevati.
Portare sul mercato un nuovo farmaco costa da 800 milioni a un miliardo di dollari. In media occorrono più di dieci anni per arrivare all’impiego clinico.
A causa dell’urgenza della lotta contro l’AMR, è necessario un approccio diverso per studiare alternative alle terapie antibiotiche.
Rispetto a tutte le cause di morte analizzate nel Global Burden of Diseases, Injuries, and Risk Factors Study (GBD) 2019, la resistenza antimicrobica (AMR) sarebbe stata la terza causa principale di morte di livello 3 GBD nel 2019, nell’ipotesi controfattuale dell’assenza di infezioni; soltanto la cardiopatia ischemica e l’ictus hanno causato più morti in quell’anno.
Inoltre, molti patogeni ospedalieri possono sopravvivere alle normali operazioni di pulizia, restare a lungo negli ospedali, nell’aria degli ambienti chiusi e sulle superfici, e contribuire alla trasmissione delle infezioni.
Le terapie alternative costituiscono un ambito di ricerca promettente. È quindi urgente sviluppare approcci innovativi contro l’AMR. Questa ricerca esamina sostanze naturali nei confronti di organismi resistenti come MRSA, E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, A. baumannii e P. aeruginosa che potrebbero non provocare ulteriore resistenza.
La scoperta di nuovi agenti antibatterici naturali con meccanismi d’azione innovativi resta una priorità mondiale.
Le sostanze antimicrobiche naturali sono state utilizzate per lungo tempo contro le infezioni batteriche e hanno rappresentato una fonte fondamentale di medicinali nella storia dell’umanità.
I prodotti naturali, comprese le piante medicinali, restano molto popolari: circa l’80% della popolazione mondiale ricorre a prodotti vegetali e integratori correlati nell’ambito dell’assistenza sanitaria.
Prodotti naturali quali Rosmarinus officinalis, Mangifera indica L. (Anacardiaceae), peptidi antimicrobici, oli essenziali vegetali e loro combinazioni hanno mostrato attività contro una vasta gamma di patogeni batterici, comprese le cinque specie AMR di questo studio.
La ricerca esamina in vitro l’eliminazione di MRSA, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii e Pseudomonas aeruginosa resistenti agli antibiotici mediante fiale CDSpure contenenti 2.990 ppm di biossido di cloro in fiale da 5 ml.
Importanza dei cinque batteri resistenti agli antimicrobici. Acinetobacter baumannii comprende batteri Gram-negativi, strettamente aerobi, non fermentanti, non mobili, catalasi-positivi e ossidasi-negativi.
Sebbene A. baumannii rappresenti una percentuale relativamente bassa delle infezioni del sangue, la multiresistenza ai farmaci in questa specie costituisce un problema mondiale.
Nel mondo oltre il 71% è multiresistente.
Negli Stati Uniti il 27% dei pazienti sottoposti a ventilazione meccanica è risultato colonizzato da ceppi di A. baumannii multiresistenti.
A. baumannii utilizza meccanismi di resistenza che includono beta-lattamasi cromosomiche, pompe di efflusso ed enzimi che modificano gli aminoglicosidi.
Dopo l’esposizione all’albumina sierica umana, A. baumannii regola la trascrizione delle beta-lattamasi, suggerendo possibili meccanismi intrinseci di resistenza antimicrobica nel siero.
Data la frequenza di infezioni e focolai causati da A. baumannii multiresistente, pochi antibiotici risultano efficaci contro le patologie causate da questo agente.
Numerose segnalazioni indicano che A. baumannii sviluppa rapidamente resistenza antimicrobica e che sono stati isolati ceppi multiresistenti.
L’Organizzazione mondiale della sanità (OMS) ha classificato A. baumannii come patogeno di priorità critica, una minaccia significativa per la salute umana per la quale servono urgentemente nuovi antibiotici.
Escherichia coli. Tra i ceppi che provocano infezioni urinarie e batteriemia, la resistenza a più classi di antimicrobici supera spesso il 50%.
E. coli è un batterio Gram-negativo versatile, diffuso e capace di cambiamenti genetici naturali e spontanei.
Misura 1–3 × 0,4–0,7 μm, con un volume indicato nella fonte di 0,6–0,7 μm.
Klebsiella pneumoniae (Klebsiella della polmonite)
I ceppi di Klebsiella pneumoniae sono generalmente classificati come opportunisti, ipervirulenti (hyKp) o multiresistenti (MDR).
Mentre K. pneumoniae classica (cKp) comprende ceppi opportunisti spesso associati a infezioni ospedaliere, quelli ipervirulenti sono considerati batteri acquisiti in comunità capaci di infettare persone di tutte le età, anche sane.
La rapida diffusione di ceppi di K. pneumoniae multiresistenti rappresenta una grave minaccia per la salute mondiale, perché provoca numerose infezioni ospedaliere con morbilità e mortalità elevate.
Klebsiella pneumoniae viene descritta come un batterio Gram-negativo, capsulato e non mobile.
Lo Staphylococcus aureus resistente alla meticillina (MRSA) è considerato uno dei patogeni ospedalieri più pericolosi e causa molte infezioni difficili da trattare, dette MRSA associate all’assistenza sanitaria (HA-MRSA).
Negli ultimi 20–25 anni l’MRSA è stato isolato anche in contesti comunitari, portando alla definizione di MRSA associato alla comunità (CA-MRSA).
L’MRSA può provocare infezioni in vari organi, soprattutto della pelle e del tessuto sottocutaneo, oltre a infezioni invasive come osteomielite, meningite, polmonite, ascesso polmonare ed empiema.
L’endocardite infettiva causata da MRSA è associata a morbilità e mortalità maggiori rispetto ad altri organismi ed è correlata all’uso di droghe per via endovenosa.
Lo Staphylococcus aureus resistente alla meticillina (MRSA) è un cocco Gram-positivo descritto nella fonte come catalasi- e coagulasi-positivo.
Pseudomonas aeruginosa (Pseudomonas aeruginosa)
La Pseudomonas aeruginosa figura tra le cinque principali cause di batteriemia ospedaliera, spesso con conseguente sepsi.
P. aeruginosa è un importante patogeno opportunista Gram-negativo responsabile di numerose infezioni acute e croniche gravi, con morbilità e mortalità che raggiungono il 40%.
P. aeruginosa è particolarmente difficile da trattare per l’elevata resistenza intrinseca e acquisita a molti antibiotici disponibili.
È un patogeno opportunista umano capace di causare infezioni acute e croniche potenzialmente mortali, soprattutto nei pazienti immunodepressi. È particolarmente importante come causa di morbilità e mortalità nelle persone affette da fibrosi cistica.
Biossido di cloro (ClO2) come antimicrobico. Il biossido di cloro (ClO2) è un gas dal giallo al giallo-rossastro che può decomporsi rapidamente nell’aria.
Il biossido di cloro ha un peso molecolare di 67,452 g/mol e una solubilità dichiarata in acqua al livello del mare di 3,01 g/L (3.000 ppm) a 25 °C e 34,5 mm Hg.
È un biocida efficace già a concentrazioni di 0,1 ppm e in un ampio intervallo di pH. Anche in acqua fredda è dieci volte più solubile del cloro.
Il biossido di cloro ha un potenziale ossidante inferiore rispetto all’ozono e al cloro.
Il pH ottimale è compreso tra 6,0 e 10,0; al di sopra di pH 8,0 è generalmente più efficace contro i microrganismi rispetto al cloro.
Reagendo in acqua forma ioni clorito, specie chimiche molto reattive in grado di eliminare batteri e microrganismi in soluzione.
Il biossido di cloro uccide rapidamente batteri, virus e Giardia ed è efficace contro Cryptosporidium.
Il biossido di cloro migliora anche sapore e odore, degrada solfuri e fenoli, controlla le alghe e neutralizza ioni ferro e manganese.
È un biocida efficace a concentrazioni di appena 0,1 ppm e in un ampio intervallo di pH.
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Biossido di cloro, biofilm e resistenza.
La fonte presenta il biossido di cloro come adatto all’uso terapeutico perché può penetrare nei biofilm ed eliminarli.
Secondo Simpson et al. (1993), il biossido di cloro può rimuovere rapidamente i biofilm grazie all’elevata solubilità in acqua.
A differenza dell’ozono, non reagisce con i polisaccaridi extracellulari del biofilm. In questo modo può penetrare rapidamente nei biofilm fino a raggiungere ed eliminare i microbi che vi si trovano.
Penetrare nei biofilm per eliminare i microrganismi è una sfida reale sia per la medicina naturale sia per quella convenzionale.
Un biofilm è una struttura tridimensionale formata da cellule microbiche aderenti a superfici viventi o inerti in varie condizioni fisiologiche e ambientali non ancora del tutto definite.
Queste cellule inoltre si moltiplicano continuamente e producono sostanze polimeriche extracellulari (EPS), formando una matrice attorno ai microrganismi.
I biofilm sono aggregati di cellule microbiche circondati da matrici autoprodotte di esopolisaccaridi su superfici biotiche o abiotiche.
Rispetto alle cellule libere, gli organismi presenti nei biofilm sono molto più protetti dagli antibiotici, dalle difese immunitarie dell’ospite e da condizioni ambientali sfavorevoli.
Si stima che il 65–80% delle infezioni umane sia causato da batteri che formano biofilm.
Si stima che i biofilm siano 1.000 volte più resistenti agli antibiotici rispetto alle cellule libere.
Le interazioni tra cellule batteriche e fattori ambientali innescano la formazione dei biofilm.
Si sostiene che il biossido di cloro possa penetrare ed eliminare i biofilm, un vantaggio rispetto a molti antibiotici che non sono in grado di farlo.
Un altro importante vantaggio attribuito all’uso terapeutico del biossido di cloro rispetto agli antibiotici è che i batteri, secondo l’articolo, non potrebbero sviluppare resistenza nei suoi confronti.
I quattro amminoacidi cisteina, metionina, tirosina e triptofano, in particolare la cisteina e i tioli biologici, svolgono ruoli essenziali in tutti gli esseri viventi, compresi i microrganismi. Per questo l’articolo sostiene che i microbi non possano sviluppare resistenza al biossido di cloro.
Il biossido di cloro attraversa le pareti delle cellule batteriche e reagisce con amminoacidi essenziali nel citoplasma, uccidendo così l’organismo.
Un sottoprodotto di questa reazione è il clorito, che secondo il testo non è noto per presentare rischi rilevanti per l’ambiente o per la salute umana.
Sicurezza ed efficacia del biossido di cloro
Nel 1967 l’Agenzia statunitense per la protezione dell’ambiente (EPA) ha registrato per la prima volta il biossido di cloro liquido per l’impiego come disinfettante e sanificante.
Il biossido di cloro viene descritto come un antimicrobico selettivo in base alle dimensioni, capace di uccidere rapidamente microrganismi di dimensioni micrometriche senza, secondo la fonte, danneggiare organismi più grandi come uomini e animali, perché non penetrerebbe in profondità nei tessuti viventi.
Secondo la spiegazione presentata, il biossido di cloro non riesce a penetrare in profondità nei tessuti degli organismi più grandi, mentre il loro sistema circolatorio fornisce continuamente antiossidanti che li proteggono dagli effetti ossidanti della sostanza.
Vengono citate altre ricerche secondo cui il biossido di cloro, un forte ossidante, può inibire o distruggere microrganismi a concentrazioni da 1 a 100 ppm, esercitando una marcata attività antivirale e inattivando almeno il 99,9% dei virus entro 15 secondi nei test di sensibilità.
Georgiou (2021) ha segnalato un’efficacia in vitro del biossido di cloro contro MRSA, con un’inibizione della crescita del 99,99–100% anche a basse concentrazioni.
La ricerca in corso presso la Innerlight Biological Research Foundation studia da oltre 25 anni possibili applicazioni cliniche del biossido di cloro contro spore, batteri e virus e per altri impieghi.
La fonte afferma che il biossido di cloro è stato ampiamente utilizzato in applicazioni cliniche contro il virus di Epstein–Barr (EBV), il citomegalovirus (CMV), i virus dell’epatite A e B, l’HIV (virus dell’AIDS) e altri.
Il 14 ottobre 2020 il parlamento boliviano ha approvato una legge (n. 1351) che consente l’uso del biossido di cloro come medicinale contro il COVID-19.
L’articolo riferisce un impiego riuscito del biossido di cloro in paesi come Bolivia, Messico, Perù, Brasile e Colombia.
In Bolivia è stata approvata la legge n. 1351 del 2020 (Gazzetta ufficiale della Bolivia, 2020), che autorizzava preparazione, commercializzazione, fornitura e uso di soluzioni di biossido di cloro per la prevenzione e la cura durante la pandemia di COVID-19.
Più recentemente, nel 2021, uno studio di Insignares Carrione progettato per valutare l’efficacia del biossido di cloro somministrato per via orale contro il COVID-19 ha concluso che fosse efficace nel trattamento della malattia.
Il biossido di cloro è formato da tre atomi; la fonte descrive il suo legame atomico come uno ione «instabile» o «caricato negativamente».
Quando questo legame atomico si separa, secondo l’articolo, si genera un minuscolo impulso subatomico di energia che si manifesterebbe quando il biossido di cloro passa vicino a patogeni presenti nel corpo.
Il testo sostiene che la sostanza attacchi soltanto microrganismi «acidi» e «anaerobi» (virus, batteri, funghi o parassiti) nell’organismo senza danneggiare il microbioma.
Questi batteri sopravvivono soltanto in assenza di ossigeno e comprendono numerosi patogeni.
Gli organismi anaerobi non avrebbero sviluppato difese adeguate contro l’azione dell’ossigeno, soprattutto quello nascente, e soccomberebbero rapidamente alla sua azione letale.
L’articolo afferma che le cellule sane che necessitano di ossigeno per vivere, oppure definite «alcaline», restano al sicuro.
Tossicologia del biossido di cloro
La Figura 1 mostra i livelli di riferimento adottati dall’EPA statunitense per la disinfezione dell’acqua potabile (zona blu).
I livelli descritti come potenzialmente terapeutici negli animali da laboratorio senza tossicità compaiono nella zona verde; quelli tossici nella zona rossa (oltre 399 ppm).
La concentrazione di 5 ppm che negli esperimenti ha eliminato almeno il 99% dei batteri resistenti agli antibiotici è collocata nella zona blu/verde, descritta come priva di tossicità.
Figura 1. Dose di biossido di cloro usata in studi a dosi ripetute, subacuti (<28 giorni) o cronici (>90 giorni)
Il biossido di cloro viene aggiunto all’acqua potabile per proteggere le persone da batteri dannosi e altri microrganismi.
La maggior parte delle persone è esposta a piccole quantità di biossido di cloro e clorito attraverso l’acqua trattata e gli alimenti, poiché la sostanza è impiegata come disinfettante nell’industria alimentare.
L’articolo afferma che non esistono prove che il biossido di cloro o il clorito influenzino la riproduzione umana.
Gli studi riproduttivi su animali maschi non mostrano costantemente alterazioni degli indicatori della produzione spermatica, della morfologia o della motilità; gli effetti segnalati si verificano tuttavia a dosaggi superiori a quelli associati a effetti negativi sullo sviluppo.
Analogamente, alterazioni dei parametri ematici si verificano a dosi più elevate. Gli autori dichiarano di non aver trovato informazioni su decessi umani in seguito a esposizione orale al biossido di cloro.
In uno studio di Scatina, 70 volontari umani hanno bevuto una soluzione di biossido di cloro fino a 24 ppm e, secondo quanto riferito, non hanno manifestato effetti avversi.
Metodologia: materiali e metodi
Lo studio ha esaminato cinque batteri resistenti agli antibiotici: E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, S. pneumoniae, A. baumannii e P. aeruginosa.
Tutti i campioni sono stati ottenuti da un laboratorio certificato (ATTC, Germania) in fiale congelate e coltivati su piastre di agar sangue.
Un campione di ogni batterio è stato prelevato dalle colonie isolate mediante un’ansa sterile in una cabina di sicurezza di classe II e trasferito in provette sterili contenenti 5 ml di brodo di soia tripticasi (TSB).
Le provette di coltura sono state incubate a 37 °C in un incubatore Heraeus. Raggiunta una quantità sufficiente di batteri, le provette sono state congelate e conservate in azoto liquido a −176 °C fino all’uso.
Conteggio dei batteri
Per quantificare i batteri in laboratorio si usa comunemente il conteggio delle unità formanti colonia, un metodo semplice che fornisce un’indicazione generale della vitalità cellulare.
Uno svantaggio importante è che i risultati richiedono diversi giorni e possono variare fra le tecniche in funzione della preparazione dei campioni e delle condizioni.
In questo studio i conteggi batterici sono stati ottenuti con un contatore di cellule microbiche QUANTOM Tx™ di Logos Biosystems.
Questo contatore cellulare automatizzato basato sulle immagini identifica e conta singoli batteri in pochi minuti.
Il QUANTOM Tx mette a fuoco automaticamente, acquisisce e analizza più immagini di cellule marcate con fluorescenza per rilevare i batteri con sensibilità e precisione elevate.
Utilizza un algoritmo avanzato di rilevamento e separazione delle cellule per individuare singoli batteri anche in ammassi molto compatti.
In questi esperimenti è stato usato il Viable Cell Staining Kit per distinguere cellule vive o vitali da quelle morte.
Per preparare il campione destinato al QUANTOM, sono stati prelevati 10 microlitri (μl) di terreno di coltura con una pipetta elettronica DLAB precedentemente calibrata, trasferendoli in una provetta Eppendorf sterile da 1,5 ml.
Sono stati aggiunti 2 μl di Viable Cell Staining Dye e il campione è stato incubato in un incubatore Heraeus a 37 °C per 30 minuti.
Sono stati poi aggiunti 8 μl di tampone per migliorare il segnale fluorescente.
Preparazione della soluzione di biossido di cloro
Per gli esperimenti è stata utilizzata una fiala da 5 ml di soluzione di biossido di cloro CDS Pure®, prodotta da AQARIUS pro-life e dichiarata contenere esattamente 2.990 ppm di biossido di cloro (CAS 10049-04-41).
È descritta come una soluzione sterile pronta all’uso in fiala di vetro sigillata, altamente purificata mediante nanofiltrazione, a pH neutro e priva di cloro.
La soluzione di biossido di cloro (acqua demineralizzata e biossido di cloro) è descritta come priva di residui, ioni argento o nanoparticelle. Più avanti la fonte riporta una concentrazione di 2.900 ppm per fiala da 5 ml, sostenendo che ciò consenta di calcolare facilmente i millilitri necessari.
Le concentrazioni utilizzate negli esperimenti erano comprese tra 1 e 7 ppm di biossido di cloro.
I quantitativi sperimentali per ciascuna concentrazione erano: 1 ppm = 1,667 μl CDS Pure®, 2 ppm = 3,344 μl, 3 ppm = 5,016 μl, 4 ppm = 6,688 μl, 5 ppm = 8,336 μl, 6 ppm = 10,032 μl e 7 ppm = 11,704 μl. Il tempo di esposizione è stato considerato irrilevante perché la disinfezione sarebbe avvenuta immediatamente, in pochi secondi.
Alle provette è stato aggiunto biossido di cloro a diverse concentrazioni.
La quantità di soluzione di biossido di cloro utilizzata negli esperimenti variava da 1,667 μl (1 ppm) a 11,704 μl (7 ppm) della soluzione CDS da 5 ml. È stata trasferita nelle provette con una pipetta elettronica DLAB e mescolata delicatamente per ogni batterio.
Per ciascuna provetta sperimentale è stata preparata anche una provetta di controllo contenente lo stesso terreno di coltura.
In base alla quantità di biossido di cloro introdotta nella provetta sperimentale, alla provetta di controllo è stata aggiunta una quantità equivalente di acqua distillata per mantenere costante il fattore di diluizione.
Campioni di 6 μl sono stati prelevati dalle provette di controllo e sperimentali mediante pipetta elettronica e trasferiti su vetrini di conteggio cellulare M50.
I vetrini sono stati posti nella centrifuga QUANTOM per otto minuti a 300 RCF (forza centrifuga relativa), quindi trasferiti nel contatore microbico QUANTOM per ottenere una lettura iniziale del controllo e una dalla provetta sperimentale.
Le impostazioni ottimali del contatore microbico QUANTOM per i diversi batteri sono state definite in base alla forma e alle dimensioni di ciascuna specie per ottimizzare il conteggio.
Risultati
Per valutare il potenziale disinfettante del biossido di cloro nei cinque tipi di batteri resistenti agli antibiotici, sono state impiegate per tutto lo studio fiale CDSpure da 5 ml contenenti una concentrazione standardizzata di 2.990 ppm.
Le concentrazioni variavano da 1 a 7 ppm con incrementi di 1 ppm. I campioni di controllo e quelli sperimentali a ogni concentrazione sono stati esaminati in triplicato, calcolandone la media.
Questi valori sono stati confrontati con il campione di controllo che non aveva ricevuto biossido di cloro CDSpure.
Complessivamente, nei cinque esperimenti, la disinfezione ha superato il 95% alla concentrazione massima di 7 ppm; alcune specie sono state eliminate a concentrazioni inferiori, fra 4 e 7 ppm (t-test, p<0,01).
Esaminiamo ora ciascuna specie batterica nelle tabelle e nelle figure seguenti.
Disinfezione di Acinetobacter baumannii: per A. baumannii è stata riportata una disinfezione del 99% alle concentrazioni di 5, 6 e 7 ppm di biossido di cloro (t-test, p<0,01; Tabella 1, Figura 2).
Confronto dei conteggi di Acinetobacter baumannii prima e dopo l’esposizione al biossido di cloro

Disinfezione di Escherichia coli
Per E. coli la disinfezione ha superato il 98% con 7 ppm di biossido di cloro (t-test, p<0,01; Tabella 2, Figura 3).


Disinfezione di Klebsiella pneumoniae
Per K. pneumoniae la disinfezione ha superato il 94% alle concentrazioni di 6 e 7 ppm di biossido di cloro (t-test, p<0,01; Tabella 3, Figura 4).
Tabella 3: Confronto dei conteggi di Klebsiella pneumoniae prima e dopo l’esposizione al biossido di cloro
Esposizione
Confronto dei conteggi di Klebsiella pneumoniae prima e dopo il biossido di cloro
Confronto fra controllo ed esperimento con Klebsiella pneumoniae usando biossido di cloro a diverse concentrazioni

Disinfezione dello Staphylococcus aureus resistente alla meticillina (MRSA)
Per MRSA la disinfezione ha superato il 99% alle concentrazioni di 4–7 ppm di biossido di cloro (t-test, p<0,01; Tabella 4, Figura 5).
Tabella 4: Confronto dei conteggi di MRSA prima e dopo l’esposizione al biossido di cloro.

Figura 5. Confronto fra controllo ed esperimento con MRSA usando biossido di cloro a diverse concentrazioni.

Disinfezione di Pseudomonas aeruginosa: per P. aeruginosa la disinfezione ha superato il 95% alla concentrazione di 7 ppm di biossido di cloro (t-test, p<0,01; Tabella 5, Figura 6).
Questa ricerca indica che la soluzione di biossido di cloro è efficace in vitro nell’eliminare le specie batteriche resistenti agli antibiotici esaminate.
Le concentrazioni necessarie per ottenere una disinfezione di almeno il 95% contro i cinque batteri resistenti variavano da 4 a 7 ppm, valori descritti dagli autori come potenzialmente sicuri (si veda la Figura 1).
Figura 6. Confronto fra controllo ed esperimento con Pseudomonas aeruginosa usando biossido di cloro a diverse concentrazioni.
Figura 6. Confronto fra controllo ed esperimento con Pseudomonas aeruginosa usando biossido di cloro a diverse concentrazioni.
Tabella 5: Confronto dei conteggi di Pseudomonas aeruginosa prima e dopo il biossido di cloro
Esposizione.

Esposizione.
Discussione
L’aumento dei batteri resistenti agli antibiotici costituisce una grave minaccia per la salute pubblica mondiale. Questi microrganismi hanno sviluppato resistenza agli antibiotici convenzionali, rendendo le infezioni sempre più difficili da curare e causando maggiori tassi di mortalità e costi sanitari.
Si prevede che entro il 2050 i decessi annuali dovuti a malattie resistenti agli antibiotici superino i 10 milioni, oltrepassando il numero delle morti per cancro.
Si tratta di una grave minaccia per la salute mondiale: infezioni un tempo trattate rapidamente possono ora causare malattie prolungate, notevoli sofferenze e pressioni sui sistemi sanitari.
L’impatto della ricerca su alternative per eliminare i batteri resistenti agli antibiotici non deve essere sottovalutato. Secondo l’articolo, questa ricerca potrebbe salvare vite in tutto il mondo nei seguenti modi:
1. Miglioramento degli esiti per i pazienti: strategie alternative potrebbero trattare efficacemente infezioni un tempo considerate incurabili.
Prendendo di mira i batteri resistenti, questi approcci potrebbero migliorare gli esiti per i pazienti, ridurre malattia e mortalità e restituire speranza a chi soffre di infezioni resistenti.
2. Riduzione del carico sanitario: la crescente diffusione delle infezioni resistenti agli antibiotici mette sotto pressione i sistemi sanitari di tutto il mondo.
Trovare alternative per combattere la resistenza potrebbe alleggerire la pressione sulle risorse sanitarie, migliorare l’efficienza, abbreviare le degenze e diminuire la spesa sanitaria.
3. Prevenzione delle epidemie: senza adeguato controllo, i batteri resistenti possono provocare epidemie estese.
La ricerca di approcci alternativi offre la possibilità di prevenire la comparsa e la diffusione di ceppi resistenti, tutelando la salute pubblica e scongiurando epidemie su larga scala.
4. Diversificazione delle opzioni terapeutiche.
I trattamenti nuovi e naturali vengono presentati come approcci alternativi per contrastare l’antibiotico-resistenza.
Amplierebbero le opzioni disponibili agli operatori sanitari, mettendo a disposizione più strumenti per affrontare le infezioni resistenti.
Questa diversificazione aumenterebbe le possibilità di successo e contribuirebbe a superare i limiti degli antibiotici convenzionali.
5. Superamento dei meccanismi di resistenza: i batteri resistenti agli antibiotici hanno sviluppato sofisticate strategie per sottrarsi agli effetti dei farmaci tradizionali.
I trattamenti nuovi e naturali potrebbero colpire i batteri attraverso vie diverse, aggirando o superando i meccanismi di resistenza esistenti e riducendo la probabilità di fallimento terapeutico.
6. Riduzione degli effetti collaterali e della tossicità: molti antibiotici convenzionali hanno effetti indesiderati e possono essere tossici, soprattutto se utilizzati per periodi prolungati.
L’articolo suggerisce che trattamenti naturali come il biossido di cloro potrebbero presentare minore tossicità ed effetti avversi, una caratteristica che gli autori ritengono particolarmente vantaggiosa per gruppi vulnerabili come bambini, donne in gravidanza e anziani.
7. Conservazione del microbioma intestinale: gli antibiotici convenzionali possono alterare l’equilibrio dei batteri intestinali benefici, causando disbiosi e possibili conseguenze a lungo termine sulla salute.
L’articolo suggerisce che nuovi trattamenti naturali potrebbero eliminare selettivamente i batteri dannosi conservando la diversità e la funzionalità del microbioma intestinale.
Questo equilibrio è importante perché un microbioma intestinale sano svolge un ruolo fondamentale per il sistema immunitario, la digestione e il benessere generale.
8. Soluzioni sostenibili e rispettose dell’ambiente: la produzione e l’uso di antibiotici convenzionali possono avere effetti ambientali sfavorevoli, compresa la comparsa di ceppi resistenti nell’ambiente.
I trattamenti naturali provengono spesso da fonti rinnovabili, come piante o composti derivati da microbi, producibili in modo sostenibile. L’articolo suggerisce che possano inoltre degradarsi più facilmente, riducendo i danni ambientali di lunga durata.
9. Possibilità di terapie combinate: i trattamenti naturali potrebbero essere associati ad antibiotici convenzionali o ad altre terapie alternative per ottenere effetti sinergici e migliorare i risultati.
Questo approccio consentirebbe regimi terapeutici individualizzati e adattati al paziente, ottimizzando i potenziali vantaggi di ogni metodo.
Le terapie combinate potrebbero essere più efficaci contro i batteri resistenti, abbreviare i trattamenti e prevenire lo sviluppo di ulteriore resistenza.
10. Opzioni terapeutiche accessibili ed economiche: in molte parti del mondo gli antibiotici convenzionali sono difficili da reperire oppure hanno costi proibitivi.
I trattamenti naturali prodotti da risorse locali potrebbero offrire alternative più accessibili e meno costose per le infezioni resistenti.
Questo potrebbe avere un effetto significativo sulla salute mondiale, soprattutto nei contesti con risorse limitate dove la resistenza agli antibiotici pesa maggiormente.
Alla ricerca di alternative efficaci, l’articolo presenta il biossido di cloro come un’opzione promettente per eliminare i batteri resistenti agli antibiotici.
Lo descrive come una sostanza che altera le strutture cellulari batteriche, impedendo ai batteri di riprodursi e provocare ulteriori danni.
Vantaggi del biossido di cloro
Il biossido di cloro viene presentato come un agente promettente contro i patogeni resistenti.
L’articolo descrive la sua attività ad ampio spettro, l’efficacia residua, la presunta minore probabilità di selezionare resistenza e la sicurezza ambientale come caratteristiche preziose nella lotta contro i batteri resistenti agli antibiotici.
Sostiene che l’integrazione del biossido di cloro in strategie complete di controllo delle infezioni potrebbe ridurre sensibilmente i decessi, proteggere la salute pubblica e affrontare il crescente problema dell’antibiotico-resistenza.
L’articolo elenca diversi presunti vantaggi del biossido di cloro contro i microrganismi resistenti agli antibiotici. Attività ad ampio spettro: la sostanza avrebbe mostrato attività contro molti batteri, compresi MRSA e altri ceppi resistenti.
La capacità di colpire la parete cellulare batterica e alterare processi metabolici essenziali viene presentata come un elemento che la rende un efficace agente antimicrobico.
Efficacia residua: a differenza dei disinfettanti tradizionali, il biossido di cloro mostrerebbe un’azione residua che protegge le superfici anche dopo l’applicazione iniziale.
Questa azione residua è particolarmente importante negli ambienti sanitari, dove le superfici possono contaminarsi rapidamente, e fornirebbe una protezione continuativa contro la colonizzazione e la trasmissione batterica.
Minore probabilità di sviluppo di resistenza:
L’articolo afferma che il meccanismo d’azione del biossido di cloro riduce la probabilità che i batteri sviluppino resistenza.
A differenza degli antibiotici convenzionali che colpiscono componenti batteriche specifiche, il biossido di cloro agirebbe contemporaneamente su diverse strutture cellulari, rendendo più difficile lo sviluppo di meccanismi di resistenza.
Eliminazione dei biofilm: vengono citati studi che mostrerebbero la capacità del biossido di cloro di penetrare ed eliminare i biofilm.
Si stima che i biofilm siano 1.000 volte più resistenti agli antibiotici rispetto alle cellule libere.
Sicurezza ambientale:
Il biossido di cloro viene presentato come dotato di un profilo ambientale favorevole. L’articolo afferma che si degrada in sottoprodotti innocui senza lasciare residui tossici.
Secondo l’articolo, ciò significherebbe che il suo impiego per la disinfezione non contribuisce a danni ambientali a lungo termine.
Possibili effetti:
L’articolo attribuisce grande importanza alla presunta capacità del biossido di cloro di eliminare i batteri resistenti agli antibiotici.
Sostiene che un’opzione terapeutica alternativa potrebbe aiutare ad affrontare l’antibiotico-resistenza, ridurre la mortalità e alleggerire la pressione sui sistemi sanitari.
La sua attività segnalata contro MRSA e altri ceppi resistenti viene presentata come potenzialmente capace di migliorare gli esiti, abbreviare i ricoveri e ridurre i costi sanitari.
Rapporto costo-efficacia:
La soluzione di biossido di cloro è economica e l’articolo suggerisce che potrebbe ridurre notevolmente la spesa sanitaria di un paese nel tempo.
Conclusioni
La ricerca ha esaminato in vitro l’efficacia del biossido di cloro contro alcuni patogeni batterici resistenti agli antibiotici particolarmente importanti, associati a moltissimi decessi nel mondo.
Gli autori riferiscono che la concentrazione ottimale per una disinfezione in vitro quasi completa è stata di 7 ppm (p<0,01).
La fonte descrive questa come una dose sicura da ingerire, paragonandola a una concentrazione impiegata per il trattamento dell’acqua.
Suggerisce inoltre che quanto osservato in vitro si verificherà probabilmente anche nell’organismo umano.
Afferma che, come il sangue, il biossido di cloro rilascia ossigeno quando incontra un ambiente acido, per esempio a causa dell’acido lattico o dell’acidità di un microrganismo.
L’articolo sostiene che, decomponendosi, il biossido di cloro rilasci ossigeno nel sangue come i globuli rossi, secondo lo stesso principio (detto effetto Bohr), presumibilmente perché agirebbe selettivamente negli ambienti acidi.
Il biossido di cloro viene descritto come un antimicrobico selettivo in base alle dimensioni, capace di uccidere rapidamente microrganismi micrometrici senza, secondo la fonte, danneggiare significativamente organismi molto più grandi come uomini e animali perché non penetrerebbe in profondità nei loro tessuti.
L’impiego del biossido di cloro è stato oggetto di numerose controversie.
L’articolo sostiene tuttavia che, come per qualsiasi farmaco o integratore, le conseguenze dell’esposizione a una sostanza dipendono dalla via di somministrazione (per esempio inalatoria, topica o orale), dalla sua forma (gassosa o in soluzione acquosa), dalla concentrazione, dalla durata dell’esposizione, dalle caratteristiche e abitudini individuali e dalla presenza di altre sostanze chimiche o impurità.
Sottolinea che negli anni sono stati condotti numerosi studi tossicologici su uomini e animali e afferma che questi ne dimostrerebbero sicurezza ed efficacia nelle applicazioni finalizzate a mantenere l’esposizione umana entro limiti sicuri.
Secondo il testo, il biossido di cloro sarebbe sicuro quando usato correttamente nelle basse dosi che vengono presentate come necessarie per neutralizzare i microrganismi.
L’articolo descrive risultati positivi di recenti sperimentazioni cliniche con biossido di cloro per COVID-19, condotte da Insignares–Carrione nel 2021, nelle quali afferma che ai pazienti fu somministrato per via endovenosa biossido di cloro CDS molto puro (2.990 ppm).
Fa inoltre riferimento ad autorizzazioni governative delle soluzioni di biossido di cloro per la prevenzione e il trattamento del COVID-19 in Bolivia, attraverso una legge adottata nel 2020.
Afferma che un comitato etico è stato costituito legalmente e approvato dal Ministero della salute boliviano, che studia le applicazioni del biossido di cloro tramite comitati clinici, scientifici e di etica della ricerca.
La fonte sostiene inoltre che il biossido di cloro sia stato ampiamente utilizzato in applicazioni cliniche contro il virus di Epstein–Barr (EBV), il citomegalovirus (CMV), i virus dell’epatite A e B, l’HIV (virus dell’AIDS) e altri.
Ulteriori ricerche hanno studiato nel corso degli anni il possibile impiego clinico del biossido di cloro contro spore, batteri e virus di diverso tipo.
Esistono inoltre centinaia di testimonianze di volontari sull’uso del biossido di cloro, raccolte nel corso degli anni da Jim Humble per diverse presunte applicazioni della sostanza.
Sono necessari studi clinici per stabilire quali approcci funzionerebbero meglio nella pratica medica.
La fonte suggerisce che i medici che praticano infusioni endovenose possano utilizzare direttamente fiale CDSpure da 5 ml (2.990 ppm), oppure somministrare oralmente la sostanza dopo diluizione ai livelli indicati.
Conflitti d’interesse: nessuno
Dichiarazione sui finanziamenti: nessuno
Versione originale dello studio su Scribd.
Eradication of Antibiotic Resistant Bacteria Using Chlorine Dioxide.
Eradication of Antibiotic Resistant Bacteria Using Chlorine Dioxide by sfagi on Scribd
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Pubblicato: 2023
Citazione: Georgiou G, Kotzé A, et al., 2023. Eradication of Antibiotic-Resistant E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, S. pneumoniae, A. baumannii, and P. aeruginosa with Chlorine Dioxide In Vitro, Medical Research Archives, [online] 11(6).
https://doi.org/10.18103/mra.v11i7.2.4218
Copyright: © 2023 European Society of Medicine. Questo articolo ad accesso aperto è distribuito secondo i termini della licenza Creative Commons Attribution, che ne consente l’uso illimitato,
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DOI
https://doi.org/10.18103/mra.v11i7.2.4218
ISSN: 2375-1924
ARTICOLO DI RICERCA
Eliminazione in vitro di E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, S. pneumoniae, A. baumannii e P. aeruginosa resistenti agli antibiotici mediante biossido di cloro
George Georgiou – Ricercatore principale – admin@docgeorge.com
Agnieszka Kotzé – Ricercatrice – aggie.kotze@gmail.com
Published: June 30, 2023
Citation: Georgiou G, Kotzé A, et al., 2023. Eradication of Antibiotic-Resistant E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, S. pneumoniae, A. baumannii, and P. aeruginosa with Chlorine Dioxide In Vitro, Medical Research Archives, [online] 11(6).
https://doi.org/10.18103/mra.v11i7.2.4218
Copyright: © 2023 European Society of Medicine. This is an open-access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution License, which permits unrestricted use,
distribution, and reproduction in any medium, provided the original author and source are credited.
DOI
https://doi.org/10.18103/mra.v11i7.2.4218
ISSN: 2375-1924
RESEARCH ARTICLE
Eradication of Antibiotic-Resistant E. coli, S. aureus, K. pneumoniae, S. pneumoniae, A. baumannii, and P. aeruginosa with Chlorine Dioxide In Vitro
George Georgiou – Principal Investigator – admin@docgeorge.com
Agnieszka Kotzé – Researcher – aggie.kotze@gmail.com





